細胞凋亡檢測
服務簡介：
細胞凋亡(Apoptosis)：多細胞有機體為調控機體發育、維持內環境穩定，由基因控製的細胞主動性死亡過程。多細胞生物體內，某些細胞的死亡是個體發育中一個預定的，並受到嚴格程序控製的正常組成部分。不同於一般的細胞壞死(cell necrosis)。細胞凋亡是指由基因控製的細胞自主有序死亡的主動過程，涉及一係列基因的激活、表達以及調控等的作用。針對凋亡時期不同，檢測的方法有所不同。
提供的細胞凋亡檢測技術服務包括有Annexin V/PI雙染檢測細胞早期凋亡和TUNEL法檢測細胞晚期凋亡， 可用於檢測不同類型、不同處理方式、不同時期細胞凋亡狀況及分析凋亡細胞比例。
一、流式細胞儀檢測細胞凋亡——Annexin V/PI 雙染色法
原理：在細胞凋亡早期位於細胞膜內側的磷脂酰絲氨酸（PS)遷移至細胞膜外測。磷脂結合蛋白V（Annexin V）是一種鈣依賴性的磷脂結合蛋白，它於PS具有高度的結合力。因此，Annexin V可以作為探針檢測暴露在細胞外測的磷脂酰絲氨酸。故利用對PS有高度親和力的Annexin V，將Annexin V標記上熒光素（如異硫氰酸熒光素FITC），用流式細 胞儀即可檢測凋亡細胞。細胞發生凋亡時，膜上的PS外露早於DNA斷裂發生，因此Annexin V染色法檢測早期細胞凋亡較TUNEL法更為靈敏；Annexin V染色法不需固定細胞，可避免PI染色因固定造成的細胞碎片過多及TUNEL法因固定出現的DNA片段丟失。因此，Annexin V法更加省時，簡單，結果更為可靠，是目前zui為理想的檢測細胞凋亡的方法。
二、TUNEL
原理：TUNEL（TdT-mediated dUTP nick end labeling）細胞凋亡檢測桃子视频官网是用來檢測組織細胞在凋亡早期過程中細胞核DNA的斷裂情況。其原理是熒光素（fluorescein）標記的dUTP在脫氧核糖核苷酸末端轉移酶（TdT Enzyme）的作用下，可以連接到凋亡細胞中斷裂DNA的3’-OH末端，並與連接辣根過氧化酶（HRP，horse-radish peroxidase）的熒光素抗體特異性結合，後者又與HRP底物二氨基聯苯胺（DAB）反應產生很強的顏色反應（呈深棕色），特異準確地定位正在凋亡的細胞，因而在光學顯微鏡下即可觀察凋亡細胞；由於正常的或正在增殖的細胞幾乎沒有DNA斷裂，因而沒有3‘-OH形成，很少能夠被染色。本桃子视频官网適用於組織樣本（石蠟包埋、冰凍和超薄切片）和細胞樣本（細胞塗片）在單細胞水平上的凋亡原位檢測。還可應用於抗腫瘤藥的藥效評價，以及通過雙色法確定細胞死亡類型和分化階段。
服務流程：
Annexin V/PI雙染檢測調亡（適用於細胞早期凋亡檢測）
1.細胞培養及接種
2.誘導細胞凋亡
3.細胞收集、計數
4.Annexin V/PI標記
5.流式細胞儀檢測
6.結果分析
TUNEL法檢測細胞凋亡（適用於細胞晚期凋亡檢測）
1.標本預處理
2.內源性過氧化物酶滅活
3.TdT酶反應
4.生物素標記
5.染色
6.封片觀察
收費標準/服務周期/提供結果：
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